The phenotype and function of TILs
以CAR-T和TCR-T为代表的过继性细胞免疫治疗已经成为对抗肿瘤的潜力武器，TIL疗法的出现，则为实体瘤治疗开辟新路径。自上世纪80年代TIL被发现可抑制患者体内黑色素瘤细胞的转移能力以来，TIL疗法的研发一直缓慢进行。近5年，TIL疗法针对黑色素瘤、晚期宫颈癌灯实体瘤的临床试验结果优异，备受关注。预计在2025年，中国首个TIL疗法上市，药物平均价格在60-80万人民币。作为一种高度差异化、定制化和靶向性的免疫疗法，TIL疗法未来将重点克服治疗副作用和商业化进程的难题，逐步成为重点肿瘤治疗方式。用于ACT的TIL组成和表型决定治疗结果。
1.TIL疗法可克服肿瘤异质性等问题：免疫细胞来源不同，细胞培养过程不同，体外扩增增强T细胞数量和效力，激活T的活性，克服细胞免疫能力缺失的问题。TIL疗法克服肿瘤异质性的特点：来源于患者自身肿瘤组织，自然靶向患者肿瘤特异性抗原。筛选培养而不是修饰T淋巴细胞。**肿瘤识别率高。 ** TIL通过增强T细胞的数量和效力，克服细胞免疫能力不足，回输数量E11。（100-1500亿细胞）
2.TIL疗法在实体瘤治疗领域表现优异：宫颈癌 黑色素瘤 美国lovance公司。
3.减少TIL疗法副作用成为未来趋势
4.细胞活性持续较短
1922 Mac Carty 1986 Rosenberg young TIL方法，在没有体外肿瘤反应性选择的情况下快速扩增TIL。
TIL的表型和功能
肿瘤间质中异质性的淋巴细胞，包括T和NK，大多数情况下以CD3+CD8+T为主，主要抗肿瘤效应是细胞免疫反应。
Topalian 使用OKT3 （CD3）抗体、IL-12以及辐射灭活的单个核细胞作为饲养细胞进行培养刺激，用于治疗晚期黑色素瘤、肺癌
或者CD3/CD28偶联磁珠，IL-2\GM-CSF\IL-4\IFNγ、基因混合淋巴细胞、自体肿瘤细胞及其上清
IL-12诱导和DC活化TIL
TNFa\VEGF逆转录病毒转染Til
TIL制备和疗效（以不同癌症为线索）
TIL的研究趋势
- TIL基因的导入：由于TIL具有一定的肿瘤定向聚集能力，将抗肿瘤细胞因子或MHC基因导入TIL
- TIL的过继免疫治疗：通过PD-1和4-1BB作为肿瘤标志物从黑色素瘤患者PBMC筛选肿瘤变异抗原活性的杀伤性T
- TIL单细胞水平的研究
- 为了降低大剂量IL－2的毒性，提高传统TIL治疗的体内存活率和功能，新一代TIL产品正在积极研究中。新一代TIL是一种转基因TIL，通过病毒转导过度表达一个感兴趣的基因，或 者通过CRISPR或TALEN等技术敲除（KO）目标基因。
问题
- 回输TIL无法完全去除免疫抑制，抑制包括但不限于免疫抑制分子、细胞因子和代谢物的上调、共刺激分子的下调以及免疫调节细胞亚群的存在，如Tregs、MDSCs和TAMs
- 回输TIL经血液循环后存在数量较少
- 联合治疗难以普及
- TIL仍以实验为主，缺乏长期临床观察，对机制 表型 MHC影响需要研究
- 高剂量的IL－2作为支持输注的TIL生长和活性的常规使用，可能会限制TIL治疗的临床应用。
- 扩增难度大
- TIL活性难以保证，如何在保证TIL活性的前提下使用IL-2扩增TIL
- TIL疗法制备难度大，耗时约为60-100天，操作流程复杂，标准制定困难
TIL的修饰：
- 1.TIME lncRNA 修饰物 (TIL-lncRNA) 目前仅有预后预测研究
- E/S (c) TIL：Enhanced TIL是在普通TIL细胞基础上，加入免疫检查点-共刺激分子的反向转换分子，制备增强型TIL，将肿瘤微环境的抑制信号转换为T细胞的共刺激信号。SuperTIL是将TIL转染免疫检查点-共刺激分子的反向转换和扩增分子后，使得TIL获得攻克肿瘤微环境障碍的能力，以及在体内无限复制扩增的能力，形成增强后的TIL细胞，凭借TIL对肿瘤天然免疫的特异性，同时解决肿瘤识别、克服微环境和高效扩增三大难题。制备时间5-15天。
T细胞活化的几个阶段，到exhausted,TIL的分群，一群是不可逆的，一群是可逆的，相信在晚期还不可能被逆转的？