RPMI1640, DMEM, IMDM,and MEM

1640 medium

  1. 取出胎牛血清恢复室温2小时,取250ml滤器,打开超净台,准备好负压设备(在冰箱的后面)
  2. 用黑色马克笔做好标记
  3. 先加入100-150ml PRIM基础培养基,25ml移液枪加入胎牛血清,加入再加入2.5ml双抗,2.5ml丙酮酸钠,2.5ul巯基乙醇。最后使用PRMI培养基标定250ml.
  4. 连接-抽滤-抽滤完成之后盖好盖子-标记-放入4°冰箱

DMEM

  1. 取出胎牛血清恢复室温2小时,取250ml滤器,打开超净台,准备好负压设备(在冰箱的后面)
  2. 用黑色马克笔做好标记
  3. 先加入100-150ml DMEM基础培养基,25ml移液枪加入胎牛血清,最后使用DMEM培养基标定250ml.
  4. 连接-抽滤-抽滤完成之后盖好盖子-标记-放入4°冰箱

关于RPMI与DMEM的说明:Wells实验室在所有步骤中都使用RPMI。 RPMI中的病毒颗粒可能更稳定,因此最终的病毒生产应在完整的RPMI中进行。转染可能可以在DMEM中完成。

RPMI 1640主要用于悬浮细胞培养。可适用于哺乳动物、特殊造血细胞、正常或恶性增生的白细胞,杂交瘤细胞的培养。其它像K-562、HL-60、IM-9等成淋巴细胞、T细胞淋巴瘤细胞以及HCT-15上皮细胞等均可参考使用。

DMEM适用于贴壁细胞生长,如各种实体瘤贴壁细胞。

IMDM(Iscove’s Modified Dubecco’s Medium ) 又称为伊思柯夫改良培养液。当初是为培养B 淋巴细胞设计的,当然也可以用于其它细胞。它含有更高浓度的营养成分,适合于高密度细胞培养,如制备抗 体时的杂交瘤细胞培养

含有L-谷氨酰胺4.00mM; HEPES缓冲液25mM;不含α-硫代甘油;不含碳酸氢钠;含酚红。

主要用于培养hybridoma cell lines ,macrophages,HUT78等细胞,并且这些IMDM培养的细胞同样也可以用RPMI-1640培养。

因为IMDM与RPMI-1640的差别也主要在于酚红和丙酮酸钠等成分的差别,比如,IMDM的酚红含量是RPMI-1640的3倍,并且其中含25mM HEPES和L-谷氨酰胺。

之所以使用1640和DMEM是因为这两种培养基比较大众化,价格也比较便宜.而IMDM可谓为豪华版培养基,价格为前两种的1.5倍(以hyclone)为准.一般而言,IMDM适合高密度细胞培养,如细胞工程,造血干细胞,血液细胞培养.实际上,IMDM也可以用来培养其它细胞,如成纤维细胞,肿瘤细胞,其收获量为大约为1640的2-3倍左右.

DMEM | 肿瘤细胞
RPMI1640 | 淋巴细胞
IMDM | 人的组织细胞。进行细胞杂交、基因转移实验,可选择IMDM
MEM | 常用基础培养基